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普魯士藍(lán)染色實驗代測

普魯士藍(lán)染色實驗代測
實驗樣本類型:石蠟切片
主要用途:觀察組織內(nèi)鐵粒子的含量和定位
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  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-10-26
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詳細(xì)介紹

普魯士藍(lán)染色實驗代測

普魯士藍(lán)染色簡介:

在酸性條件下,切片內(nèi)的高鐵鹽與亞鐵作用生成亞鐵氰化鐵(普魯士藍(lán)反應(yīng))。

鐵反應(yīng)是用來鑒別組織或細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)的黃棕色色素是屬于哪一種色素,入黑色素、脂褐素、甲醛色素還是含鐵血黃素。

 

染色步驟(僅供參考):

1、石蠟切片脫蠟至水;

2、蒸餾水洗兩次;

3、取等量2%亞鐵氫化鉀和2%鹽酸混合,染色30~45min;

4、蒸餾水洗,0.1%核固紅復(fù)染3min(染液用一段時間后調(diào)整為5min);

5、無水乙醇脫水(兩缸各5分鐘);

6、正丁醇30s;

7、二甲苯透明(兩缸各5min), 中性樹膠封片(封片過程中保證組織上的二甲苯不能干,否則在高倍顯微鏡下觀察易出現(xiàn)小水珠結(jié)晶)。


染色結(jié)果:

含鐵血黃素呈藍(lán)色,胞核呈紅色。

 

注意事項:

1、組織應(yīng)采用緩沖中性甲醛液固定,若用一般的甲醛液,則應(yīng)作短時間固定后即包埋切片,經(jīng)甲醛液固定的組織反應(yīng)不良。

2、鹽酸以分析純較好,因粗制鹽酸內(nèi)含有較多的鐵,可導(dǎo)致假陽性。

3、在操作過程中容器要干凈,避免使用鐵制工具(可用不繡鋼制工具)。

4、鐵反應(yīng)前的各步驟以蒸餾水沖洗,以防自來水內(nèi)的鐵離子與組織內(nèi)的鈣鹽結(jié)合產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。

5、制作對照片時,取另一張相同連續(xù)切片脫蠟至水,置入5%的草酸中作用2~6小時,即可將含鐵血黃素溶去,再染普魯士藍(lán),鐵反應(yīng)陰性。


普魯士藍(lán)染色實驗代測

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