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PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)

PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)基線(baseline)通常是3-15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào);同一次反應(yīng)中針對(duì)不同的基因需單獨(dú)設(shè)置基線

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PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)


Real-time qPCR常見(jiàn)參數(shù)

基線(baseline)通常是3-15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)

同一次反應(yīng)中針對(duì)不同的基因需單獨(dú)設(shè)置基線

閾值(threshold

自動(dòng)設(shè)置是3-15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10

手動(dòng)設(shè)置:置于指數(shù)擴(kuò)增期,剛好可以清楚地看到熒光信號(hào)明顯增強(qiáng)

同一次反應(yīng)中針對(duì)不同的基因可單獨(dú)設(shè)置閾值,但對(duì)于同一個(gè)基因擴(kuò)增一定要用同一個(gè)閾值。

Ct:與起始濃度的對(duì)數(shù)成線性關(guān)系。

分析定量時(shí)候一般取Ct:15-35。太大或者太小都會(huì)導(dǎo)致定量的不準(zhǔn)確。

RnNormalized reporter)是熒光報(bào)告基團(tuán)的熒光發(fā)射強(qiáng)度與參比染料的熒光發(fā)射強(qiáng)度的比值。

Rn:△RnRn扣除基線后得到的標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果(△Rn=Rn-基線)。

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