支原體染色液(Dienes)
產(chǎn)品簡介:
支原體染色液(Dienes染色液)是一種經(jīng)典的利用天青美藍染色檢測支原體污染的試劑,經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞以及組織切片的細胞凋亡檢測,該試劑檢測細胞含量范圍一般為 0.1~1×106 之間,Dienes 染色液亦可用于泌尿生殖道感染細菌的染色鑒別。
該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
自備材料:
1、PBS 或生理鹽水
2、載玻片、蓋玻片
3、顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
(一)貼壁細胞
1、取潔凈蓋玻片在 70%乙醇中浸泡 5 分鐘或更長時間,無菌超凈臺內(nèi)吹干或用無菌 PBS
或生理鹽水洗滌 3 次,再用細胞培養(yǎng)液洗滌 1 次。
2、將蓋玻片置于 6 孔板或其他培養(yǎng)皿內(nèi),接種細胞培養(yǎng)過夜,使融合率約為 50%~80%。
3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面,孵育 1~2min。
4、棄染色液,PBS 或生理鹽水洗 2 次,每次 3min,吸盡液體。
5、顯微鏡下觀察。
(二)懸浮細胞
1、低速離心后吸去大部分液體保留約 50μl 液體,再緩緩懸起細胞,滴加至載玻片上,盡
量使細胞分布均勻。
2、稍晾干,使細胞貼在載玻片上不易隨液體流動。
3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面,孵育 1~2min。
4、棄染色液,PBS 或生理鹽水洗 2 次,每次 3min,吸盡液體。
5、顯微鏡下觀察。
(三)懸浮細胞
1、用棉試子在載玻片上涂一層 Dienes 染色液,待干。
2、挑取細菌,置于載玻片上。
3、覆蓋玻片,密封,觀察菌落形態(tài)。
(四)支原體菌落
1、將
3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面,孵育 1~2min。
4、棄染色液,PBS 或生理鹽水洗 2 次,每次 3min,吸盡液體。
染色結(jié)果:
支原體菌落呈藍色,L 型細菌菌落在短時間內(nèi)呈藍色,但 30~60min 后逐漸褪色,呈無色。
注意事項:
1、在為了獲得細胞沉淀的離心的過程中,對于特殊細胞,如果細胞沉淀不充分,可以適當
提高離心力或延長離心時間。
2、如染色太深不宜觀察,可用蒸餾水將染液稀釋 50~300 倍。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個月有效。
支原體染色液(Dienes )