PRODUCT CLASSIFICATION
產(chǎn)品分類上海信帆生物供應(yīng)SUMO蛋白酶,產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量穩(wěn)定,歡迎大家!
重組SUMO蛋白酶是通過通過酵母編碼的ΜlP1基因,在大腸桿菌中表達(dá),經(jīng)多次純化獲得。SUMO蛋白酶能夠識(shí)別并且地將SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)從融合蛋白上切割下來。相對(duì)于EK和TEV等蛋白酶的短小識(shí)別位點(diǎn),SUMO蛋白酶能夠識(shí)別完整的SUMO序列,并依賴于正確的蛋白質(zhì)構(gòu)象,所以SUMO蛋白酶不會(huì)錯(cuò)切融合的蛋白。SUMO蛋白酶的效力可維持在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中,例如溫度(4~30℃)、pH(5.5~9.5)等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標(biāo)簽,便于融合蛋白切割后的親和層析純化。
使用建議:
因?yàn)椴煌鞍椎孜?,SUMO蛋白酶的酶切效率會(huì)有差異,可以在大量酶切前,先小量酶切測(cè)試在不同溫度下的酶切效率。
應(yīng)用實(shí)例:
圖例一)SUMO蛋白酶酶切反應(yīng):每個(gè)泳道含有15μg的目標(biāo)蛋白與20 U/mg比例進(jìn)行SUMO酶切的上樣。在室溫(25℃)經(jīng)過不同時(shí)間反應(yīng)后用15%的SDS-PAGE膠檢測(cè)酶切效果。
每個(gè)反應(yīng)所用酶切時(shí)間分別為:
Lane 1: No Sumo蛋白酶
Lane 2: 5 units/mg
Lane 3: 10 units/mg
Lane 4: 20 units/mg
Lane 5: 蛋白Marker
活性定義:
在1×SUMO Protease Buffer(無鹽)反應(yīng)體系中(50mM Tris-HCl,pH 8.0,0.2% Igepal,1 mM DTT),加入1U SUMO Protease及5μg的反應(yīng)底物(His-SUMO-GFP)補(bǔ)H2O至總體積100μl,25℃條件下反應(yīng)1小時(shí),酶切效率達(dá)90%以上。
質(zhì)量保證:
經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測(cè)僅可見清晰單一的目的條帶;本制品不含有非特異性的蛋白酶切活性。
儲(chǔ)存條件:
本SUMO蛋白酶的濃度為5,000U/ml。儲(chǔ)存于-20℃以下,避免反復(fù)凍融,可穩(wěn)定保存一年以上。
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