人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa試劑盒簡(jiǎn)介

C反應(yīng)蛋白是由肝臟合成的一種全身性炎癥反應(yīng)急性期的非特異性標(biāo)志物, 是心血管事件危險(xiǎn)zui強(qiáng)有力的預(yù)測(cè)因子之一。

hs-CRP 超敏C反應(yīng)蛋白是研究實(shí)驗(yàn)室采用了超敏感檢測(cè)技術(shù)，能準(zhǔn)確的檢測(cè)低濃度C反應(yīng)蛋白，提高了試驗(yàn)的靈敏度和準(zhǔn)確度，是區(qū)分低水平炎癥狀態(tài)的靈敏指標(biāo), 血清hs-CRP 水平與動(dòng)脈粥樣硬化及急性腦梗死( ACI) 的發(fā)生、嚴(yán)重程度及預(yù)后密切相關(guān) 。

病理研究編輯

有研究顯示,在急性腦梗死老年患者中,CRP 升高者預(yù)后不佳;hs-CRP 含量與梗死面積、神經(jīng)功能缺損程度相關(guān), 是腦梗死患者病變程度的指標(biāo)之一;而且CRP 也參與了血栓形成和動(dòng)脈硬化的病理過程,是腦卒中的危險(xiǎn)因素之一。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的炎癥反應(yīng)是斑塊破裂和不穩(wěn)定的重要原因,在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成過程中,CRP 、補(bǔ)體復(fù)合物和泡沫細(xì)胞等沉積在動(dòng)脈壁內(nèi),CRP 可與脂蛋白結(jié)合, 激活補(bǔ)體系統(tǒng), 產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì),釋放氧自由基, 造成血管內(nèi)膜損傷、血管痙攣及不穩(wěn)定斑塊脫落, 加重動(dòng)脈粥樣硬化所致的管腔狹窄以及ACI 的發(fā)生 。越來越多的證據(jù)表明, 低水平CRP 與心血管疾病的其他危險(xiǎn)因素密切相關(guān), 如高血壓、高脂血癥; 同時(shí),CRP 升高可增加高血壓患者心臟病、腦卒中的發(fā)病率; 因此,CRP 是與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、演變和發(fā)展都有關(guān)的促炎因子。流行病學(xué)調(diào)查也顯示,hs-CRP 水平升高者發(fā)生急性腦卒中的幾率是正常健康人的2 倍, 發(fā)生心肌梗死的幾率是正常者的3 倍 。2003 年歐洲高血壓防治指南( ESH/ESC) 正式推薦, 高血壓患者需檢測(cè)hs-CRP 水平。

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1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

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