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上海信帆播報:關于小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒的檢測范圍已及操作步驟

更新時間:2013-11-21      瀏覽次數(shù):1141

上海信帆生物代理銷售小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒,提供技術服務,免費代測!

該試劑盒檢測范圍: 2.5 pmol/L -80 pmol/L

操作步驟如下:

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。

80 pmol/L

5 號標準品

150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液

40 pmol/L

4 號標準品

150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

20 pmol/L

3 號標準品

150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

10 pmol/L

2 號標準品

150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

5 pmol/L

1 號標準品

150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.    溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.    配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.    洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復 5 次,拍干。

6.    加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。

7.    溫育:操作同 3。

8.    洗滌:操作同 5。

9.    顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

      15 分鐘.

10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.  測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后      15 分鐘以內(nèi)進行。

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