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高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒如何正確使用

更新時(shí)間:2021-04-21      瀏覽次數(shù):1032

 高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒如何正確使用

 

上海信帆生物供應(yīng) 高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,備有大量現(xiàn)貨。

 

高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒說明書

 

一、實(shí)驗(yàn)儀器:試管、微量移液器、旋渦混勻器、可見分光光度計(jì)(540、602630nm

二、適用范圍:本試劑盒可測(cè)各種動(dòng)物全血等樣本中高鐵血紅蛋白含量;

三、測(cè)定意義:體內(nèi)一氧化氮彌散入血后,很快與氧合血紅蛋白結(jié)合形成高鐵血紅蛋白(methemoglobin, MetHb),NOMetHb變化相關(guān),故全血MetHb檢測(cè)近年來受到研究的廣泛重視。同時(shí)血液中高鐵血紅蛋白含量的測(cè)定對(duì)接觸芳香族氨基、硝基化合物所引起的中毒性疾病的診斷與治療,有重要的意義。

四、試劑組成及配制

     A.試劑一:血紅蛋白測(cè)定濃縮液,1ml X 2,2—8℃保存。

               血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液的配制:臨用前將濃縮液用雙蒸水1:99稀釋,即100倍稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。配好的試劑2—8℃避光保存,可存放一個(gè)月以上。

     B.試劑二: 高鐵血紅蛋白測(cè)定濃縮液,30ml X 1瓶,2—8℃。

              高鐵血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液的配制:  濃縮液:雙蒸水=1:9稀釋,即10倍稀釋,可存放6個(gè)月以上。

     C.試劑三:制作還原血紅蛋白曲線用

              ① 白色粉劑 X 1支,2—8 ℃避光保存。

              ② 稀釋液,1ml X 1支,2—8 ℃保存。

              試劑三應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入1ml稀釋液,現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光。

     D.試劑四:制作高鐵血紅蛋白曲線用

              ① 磚紅色粉劑 X 1支,2—8℃避光保存。

              ② 稀釋液,1ml X 1支,2—8℃保存。

              試劑四應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入1ml稀釋液,現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光

五、操作過程:

1、制備抗凝全血:取全血立即加入到肝素抗凝管內(nèi),加蓋封口,輕輕顛倒混勻。

2、血紅蛋白含量的測(cè)定:取 0.01ml 全血與 2.5ml 100 倍稀釋的試劑一應(yīng)用液(血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液),混勻,靜置5分鐘后,1cm光徑,雙蒸水調(diào)零,540nm處測(cè)定各管吸光度值。

3、高鐵血紅蛋白測(cè)定: 0.05ml全血,加入2.5ml的試劑二稀釋應(yīng)用液(即高鐵血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液),混勻,靜置5分鐘后,1cm光徑,雙蒸水調(diào)零,測(cè)定630nm處及602nm處吸光度值。如果沒有雙波長的分光光度計(jì)則可以先測(cè)定各管630nm處吸光度值,然后再測(cè)各管602 nm處吸光度值。但一定要注意各管的編號(hào)不要弄錯(cuò)。

六、計(jì)算公式:

、血紅蛋白含量的計(jì)算:血紅蛋白克數(shù)/=540nm處吸光度值×367.7

、高鐵血紅蛋白百分比計(jì)算: MetHb% = (A630nmr x A602nm)÷(A602nm x(R r)) ×100%

、高鐵血紅蛋白含量的計(jì)算:高鐵血紅蛋白克數(shù) / = MetHb%×血紅蛋白克數(shù)/

【注1 A630即在630nm波長時(shí)樣本的吸光度值;A602即在602nm波長時(shí)樣本的吸光度值

【注2 Rr均為常數(shù),R=1.81;r=0.14。(本研究所測(cè)定常數(shù))

即計(jì)算公式可以簡化為:

、高鐵血紅蛋白百分比: MetHb% = (A630nm0.14×A602nm) ÷(A602nm ×1.67) ×100%

、高鐵血紅蛋白含量的計(jì)算:高鐵血紅蛋白克數(shù)/ = MetHb%×血紅蛋白克數(shù) /

 

 高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒如何正確使用

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