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信帆生物:做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,樣本是選擇血清還是血漿呢?
做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),檢測(cè)的指標(biāo)是用血清樣本好還是用血漿樣本?先給出結(jié)論,我們?cè)谂卸ㄖ笜?biāo)檢測(cè)時(shí):凝血功能類指標(biāo)的檢測(cè)最好選擇血漿,免疫類指標(biāo)的檢測(cè)最好選擇血清。對(duì)于其他類型指標(biāo),包括細(xì)胞因子的變化等,通常情況下血清或血漿都可以選擇。
血清與血漿的區(qū)別
血清和血漿在顏色、密度、獲取方式、成分、作用等方面存在不同。
1.顏色:血清是無(wú)色透明的,血漿是淡黃色的。
2.密度:血漿中成分較血清多,所以血漿的密度高于血清。
3.獲取方式:血清是在不加入抗凝劑的情況下進(jìn)行離心,離心后上層是血清,下層是凝血。血漿是在加入抗凝劑的情況下進(jìn)行離心,離心后進(jìn)行分離獲得的不含有血細(xì)胞的成分。
4.成分:血清中不含有血細(xì)胞、凝血因子等。血漿中不含有血細(xì)胞,但含有凝血因子。
5.作用:血清能夠提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、結(jié)合蛋白等。血漿主要起到維持酸堿平衡、膠體滲透壓等作用,還參與免疫、凝血等。
◇ 血清中無(wú)纖維蛋白原和某些凝血因子;
◇ 血清中無(wú)參與凝血的血漿蛋白;
◇ 血漿中無(wú)一些凝血過(guò)程中血小板釋放的物質(zhì)。
Tips:血漿可以通過(guò)去除纖維蛋白原等凝血因子形成血清。
◆ 血清多用于血液生化、免疫等方面的檢測(cè);
◆ 血漿多用于凝血等方面的檢測(cè);
◆ 全血?jiǎng)t多用于血細(xì)胞、血常規(guī)、血沉等方面的檢測(cè)。
血清及血清的主要成分
血清:是指血液凝固后,血漿成分中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體,它是不含血細(xì)胞(包括血小板)等成分的血液液體部分。
血清的主要成分 | |
血清蛋白 | 總蛋白、白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白等 |
糖類 | 葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖 |
脂質(zhì) | 總膽固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL膽固醇 |
血清酵素 | GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脫水酵素)、淀粉酶、堿性碳酸酶、酸性碳酸酶、膽素脂酶、醛縮酶 |
激素 | 促甲狀腺激素、甲狀腺激素 |
色素 | 膽紅素、吲哚青綠(ICG)、磺溴酞鈉(BSP) |
有機(jī)鹽 | 肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·凈化值 |
電解質(zhì) | 鈉(Na)、鉀(K)、鈣(Ca)、氯(Cl) |
血漿與血漿的主要成分
血漿:血液的重要組成部分,是全血經(jīng)抗凝處理后,通過(guò)離心分離出全部血細(xì)胞(包括血小板),所獲得的呈淡黃色透明液體的部分。血漿中含有纖維蛋白原(纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白,具有凝血作用)和凝血因子。
血漿的主要成分 | |
血漿蛋白 | 可分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原等 |
非蛋白氮 | 尿素、尿酸、肌酐、氨基酸、多肽、氨和膽紅素等 |
無(wú)機(jī)鹽 | 血漿中的無(wú)機(jī)物,絕大部分以離子狀態(tài)存在。如:Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、HCO3-、HPO42-、SO42-等 |
在藥代研究中二者各有優(yōu)缺點(diǎn):
① 血漿中含有抗凝物質(zhì)(EDTA或肝素),可能干擾化合物的結(jié)合或檢測(cè),血清則無(wú);
② 血漿制備快速,直接低溫離心后即可分離,血清制備則耗時(shí)較長(zhǎng)。這一點(diǎn)對(duì)藥代試驗(yàn)影響較大,因給藥后4小時(shí)內(nèi)一般取血點(diǎn)較為密集;
③ 血清的凝血過(guò)程可能會(huì)與藥物產(chǎn)生吸附作用,從而減少血清的含量,造成實(shí)驗(yàn)中的誤差。
血清、血漿的制備方法
# 血清樣本的制備 #
① 使用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室溫下放置1小時(shí)或2-8℃過(guò)夜,分離出血清;
② 2-8℃條件下,以1000×g離心20分鐘,小心收集上層血清。
# 血漿樣本的制備 #
① 使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,采集后30分鐘內(nèi),2-8℃條件下,以1000×g離心15分鐘,小心收集上層血漿;
② 常見(jiàn)的抗凝劑包括:EDTA鈉鹽,肝素鈉,枸櫞酸鈉等。ELISA實(shí)驗(yàn)中,通常推薦EDTA鹽(EDTA-Na2或EDTA-K2)作為抗凝劑。
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