肝素-瓊脂糖凝膠6FF的應(yīng)用有哪些

產(chǎn)品名稱：肝素-瓊脂糖凝膠 6FF

特點(diǎn)：基團(tuán)脫落少，結(jié)合特異性強(qiáng)

基質(zhì)：6%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠

配基：肝素

配基密度：2-4mg/ml

吸附載量：2-3mg 抗凝血因子Ⅲ（AT Ⅲ ）/ml

顆粒大小：45-165μm

最大流速：300cm/h

pH范圍：4-10，在位清洗時(shí)pH范圍可到3-13

保存條件：4～8℃密閉保存

應(yīng)用：肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子結(jié)合，所以肝素瓊脂糖凝膠可以用于這類物質(zhì)的純化。

肝素-瓊脂糖凝膠 6FF

肝素是一種含硫酸酯的酸性多糖，將它偶聯(lián)到活化的瓊脂糖凝膠上，該填料具有很高的物理化學(xué)穩(wěn)定

性。 肝素能和凝血因子和其他血漿蛋白，脂蛋白，蛋白質(zhì)合成因子，作用于核酸和類固醇受體的酶，所

以肝素瓊脂糖凝膠可以用于這類物質(zhì)的純化。

1 親和填料特性

基質(zhì) 6%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠

配基密度 2-4 mg/ml

吸附載量 2-3mg 抗凝血因子Ⅲ（AT Ⅲ ）/ml

親和填料的顆粒大小 45-165μm

最大流速* 300cm/h

pH范圍 4-10

使用溫度 4℃~常溫

*層析柱50mm*60cm，柱床高度25cm，20 °C

2 使用方法

肝素-瓊脂糖凝膠 6FF 對(duì)于不同的樣品的親和力不同，吸附載量取決于流速、pH、緩沖液組成和溫度

等參數(shù)。

2.1 裝柱

（1）讓所有的材料和試劑均平衡至層析實(shí)驗(yàn)的溫度。配制緩沖液，對(duì)所有的緩沖液進(jìn)行脫氣處理。

（2）檢查層析柱所有部件，特別是過(guò)濾網(wǎng)，密封圈，螺旋塞是否緊密，玻璃管是否干凈和完整。

（3）根據(jù)需要量取相應(yīng)量的凝膠，用去離子水清洗掉 20%乙醇。

（4）將柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位，務(wù)必使底端無(wú)氣泡。

（5）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠

在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

（6）打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過(guò)，使柱床穩(wěn)定（注意壓力不要超過(guò)填

料最大耐壓）。

2.2 樣品的制備

樣品應(yīng)溶解，并且與結(jié)合緩沖液的pH值相同。為了避免堵塞層析柱，我們建議通過(guò)0.45μm過(guò)濾器

進(jìn)行離心和過(guò)濾，以去除細(xì)胞碎片或其他顆粒物質(zhì)。

肝素-瓊脂糖凝膠6FF的應(yīng)用有哪些