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Western blot細胞樣本的處理小貼士

更新時間:2018-05-07      瀏覽次數(shù):2475

Western blot細胞樣本的處理小貼士

上海信帆生物代做Western blot實驗,下面我們給大家分享一下細胞樣本中關(guān)于懸浮細胞和貼壁細胞樣本的處理方法,希望對大家有所幫助,如果還有不清楚的地方,上海信帆生物科技有限公司,您身邊的科研專家!

細胞樣本做WB檢測
1、懸浮細胞樣品:把細胞及培養(yǎng)液一起收集到15ml或者50ml離心管中,1500rpm離心3min,棄去上清;加入PBS輕輕吹打,1500rpm離心3min,棄去上清;反復3次,棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年,建議盡快檢測。


2、貼壁細胞樣品:
2.1 胰酶消化:用胰酶將細胞消化后,收集到15ml或者50ml離心管中,1500rpm離心3min,棄去上清;加入PBS輕輕吹打,1500rpm離心3min,棄去上清;反復3次,棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年,建議盡快檢測。


2.2 細胞刮子收集細胞:對于某些蛋白(即對胰酶比較敏感或者實驗特殊要求,如E-Cadherin不易用胰酶消化后進行WB檢測),直接用細胞刮子刮下細胞,收集到EP、15ml或者50ml離心管中,1500rpm離心3min,棄去上清;加入PBS輕輕吹打,1500rpm離心3min,棄去上清;反復3次,棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年,建議盡快檢測。

信帆生物實驗室服務(wù)內(nèi)容包括Western blot實驗檢測,RT-PCR實驗檢測,免疫組化實驗檢測,放射免疫實驗檢測,生化實驗檢測,ELISA實驗檢測等等,歡迎大家!

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