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葡聚糖凝膠使用說明,葡聚糖凝膠現(xiàn)貨供應(yīng)

更新時間:2018-04-28      瀏覽次數(shù):1433

葡聚糖凝膠使用說明,葡聚糖凝膠現(xiàn)貨供應(yīng)

葡聚糖凝膠使用說明

 

葡聚糖凝膠(Sephadex)是白色珠狀顆粒,由葡聚糖經(jīng)醚鍵相互交聯(lián)聚合而成具有多孔性三度空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子分離材料,為穩(wěn)定的親水性凝膠,在水中和電解質(zhì)中很容易溶脹。不同型號的葡聚糖用英文字母 G 表示,如 G-25,G-75 等,G 后面的數(shù)字除以 10 為該凝膠每克干重所吸收水的毫升數(shù)。能使一定分子范圍的大分子進入凝膠的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)內(nèi)。溶脹程度不同,分離分級范圍也不同。具體產(chǎn)品的分離范圍及應(yīng)用如下:

 

產(chǎn)品名稱

分離范圍

應(yīng)用

葡聚糖 G-10

<700

緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,

去除下分子

 

 

葡聚糖 G-15

<1500

緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,

去除下分子

 

 

葡聚糖 G-25

1000-5000

工業(yè)上脫鹽及交換緩沖液

葡聚糖 G-50

1000-30000

多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量

測定

 

 

葡聚糖 G-75

2000-70000

蛋白分離純化、分子量測定,平衡常數(shù)測定

葡聚糖 G-100

2000-120000

蛋白分離純化、分子量測定,平衡常數(shù)測定

葡聚糖 G-150

5000-300000

蛋白分離純化、分子量測定,平衡常數(shù)測定

葡聚糖 G-200

5000-600000

蛋白分離純化、分子量測定,平衡常數(shù)測定

 

產(chǎn)品性質(zhì)

 

化學(xué)穩(wěn)定性:葡聚糖那不溶于一切溶劑(除非它被水解),在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和

 

弱酸性溶液中都有很好的穩(wěn)定性,在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑容易

 

破壞凝膠,所以應(yīng)該避免使用。在濕空氣中易長霉,可用氯、甲苯、疊氮鈉做防腐劑。

 

物理穩(wěn)定性:葡聚糖凝膠并不熔融,可以在濕態(tài)、中性 pH 進行滅菌或者高壓滅菌 120°C,

 

30 分鐘不影響它的色譜性質(zhì)。干態(tài)的凝膠加熱至 120°C 以上開始焦糖化。

 

產(chǎn)品用途

 

利用分子篩作用,主要用于除鹽、多肽分離、清洗生物提取液,分子量的測定。

 

使用方法

 

1.凝膠預(yù)溶脹

 

 

在凝膠使用前,首先將其溶脹,具體方法:室溫下,將干粉浸泡在超純水中充分溶脹 24 小

 

時,并不斷攪拌保證凝膠 充分溶脹;或者在室溫下,將干粉浸泡在 50-60%乙醇中至少 24

 

小時,并不斷攪拌以保證凝膠*溶脹,用超純水洗去乙醇;

 

2.裝柱

 

將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性注入柱內(nèi),注意要避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或者斷層,保持濕態(tài)裝柱,可在凝膠可承受的操作壓下裝柱,保證裝柱均勻,裝完柱可以檢測柱效,檢查凝膠裝填是否合格。

 

3.平衡

 

上樣前用平衡液平衡層析柱至少 3-5 個柱體積直到基線平穩(wěn);

 

4.上樣

 

凝膠過濾的上樣量一般為 5%的柱床體積,初次上樣建議控制在 1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到 20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在 40-50cm 以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為 5:1 即可

 

5.洗脫方法

 

可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;

 

6.在位清洗(CIP)

 

凝膠使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以 40cm/h

 

用 1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

 

7.保存

 

凝膠使用完后,可將其回收,可將凝膠用超純水沖洗干凈并濾干,加入 0.02%的疊氮鈉做為防腐劑,或者浸泡在 20%的乙醇中,防止長菌。

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