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ELISA檢測技術(shù)是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種檢測技術(shù)，因其具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測定，為輔助研究診斷與生物科研起到了積極的推動(dòng)作用。但ELISA測定中影響因素較多，操作過程中每個(gè)環(huán)節(jié)都會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果?，F(xiàn)對(duì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的常見因素及相應(yīng)的控制方法分析探討如下：1試劑的因素1.1試劑的選擇試劑的選擇是保證血液檢測質(zhì)量的關(guān)鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，但不同廠家的試劑在使用效果上仍...

對(duì)于實(shí)驗(yàn)質(zhì)量管理來說的*要素是，選擇和執(zhí)行適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制（internalqualitycontrol,IQC）程序，例如根據(jù)測定項(xiàng)目的質(zhì)量要求和方法特點(diǎn)選擇統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)、控制規(guī)則和質(zhì)控品的數(shù)目，并嚴(yán)格執(zhí)行IQC程序以提高IQC的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控方法很多，但酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）中仍主要采用Levey-Jennings質(zhì)控圖。筆者長期從事免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量管理工作。發(fā)現(xiàn)醫(yī)院、血站檢驗(yàn)科在實(shí)際工作中存在一些比較普遍的問題或疑問。根據(jù)自身實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合相關(guān)專著，簡要介紹如下，供實(shí)...

zui近，上海信帆生物科技有限公司在進(jìn)行了一項(xiàng)大腸桿菌電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程操作規(guī)范順利，得出的結(jié)果良好。實(shí)驗(yàn)所需試劑：國產(chǎn)細(xì)胞菌株、培養(yǎng)基、10%甘油、DNA細(xì)胞*天：1.將適合菌株（如XL1-Blue,DH5α）置于LB或其他營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，在37°C下過夜培養(yǎng)2.高溫滅菌大的離心瓶（250-500ml）以備第二天搖瓶用3.準(zhǔn)備幾瓶滅菌水（總量約1.5升），保存于冷凍室中以備第二天重懸浮細(xì)胞用第二天：4.轉(zhuǎn)移0.2-1ml過夜培養(yǎng)物至裝有500mlLB（或其...

中科院動(dòng)物研究所、武漢大學(xué)的研究人員在11月26日的美國《國家科學(xué)院院刊》（PNAS）雜志上發(fā)表了一項(xiàng)科研成果，他們在新研究中發(fā)現(xiàn)了一種新型端粒和端粒酶相互作用蛋白，證實(shí)其具有解開端粒G-quadruplex，促進(jìn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中端粒延伸的功能。中科院動(dòng)物研究所的譚錚（ZhengTan）研究員和武漢大學(xué)的趙勇（YongZhao）博士為這篇論文的共同通訊作者。前者的主要研究興趣是端粒功能與細(xì)胞衰老的機(jī)制，采用生物化學(xué)，生物物理和細(xì)胞生物學(xué)的手段研究染色體端粒DNA結(jié)構(gòu)與功能，端粒...

美國SLAC國家加速實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)家們在實(shí)驗(yàn)中揭示了攻擊一種常見胃部細(xì)菌——幽門螺旋桿菌（Helicobacterpylori）的潛在新途徑，這種細(xì)菌可以引起潰瘍，并可顯著提高形成胃癌的幾率。相關(guān)論文發(fā)表在12月9日的《自然》（Nature）雜志上。研究人員經(jīng)過五年的努力，利用來自SLAC斯坦福同步輻射光源SSRL（StanfordSynchrotronRadiationLightsource）獲得了這一突破性的成果。幽門螺旋桿菌是一種能夠生存在強(qiáng)胃酸環(huán)境下的頑強(qiáng)細(xì)菌。世界上有...

由監(jiān)督管理委員會(huì)組織實(shí)施的“P3和P4實(shí)驗(yàn)室生物安全技術(shù)與應(yīng)用”（上海信帆生物）項(xiàng)目在2013年1月18日召開2012年度國家科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)勵(lì)大會(huì)上獲得國家科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)，這標(biāo)志著我國別實(shí)驗(yàn)室生物安全技術(shù)取得重大突破。P3和P4實(shí)驗(yàn)室是指從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的別生物安全實(shí)驗(yàn)室，在烈性傳染病防治和生物反恐領(lǐng)域起關(guān)鍵作用。P4實(shí)驗(yàn)室是世界上生物安全防護(hù)水平高、也是危險(xiǎn)的實(shí)驗(yàn)室，俗稱“魔鬼實(shí)驗(yàn)室”，目前世界上只有美、俄、日、歐等少數(shù)發(fā)達(dá)國家和地區(qū)擁有。P3實(shí)驗(yàn)室是從事高致病...

我是一個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室的研究員，人們想象中我們應(yīng)該是呆板木訥的形象，但是事實(shí)上我們也和其他80后一樣，是熱情開朗活潑的人。經(jīng)常出去活動(dòng)，遇到很多朋友，詢問我的工作。zui多的問題，就是你們?yōu)槭裁匆眯∈髞碜鯡LISA試劑盒實(shí)驗(yàn)?zāi)?，現(xiàn)在就將原因告訴大家。在哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，由于小鼠體小，飼養(yǎng)管理方便，易于控制，生物試劑繁殖快，研究zui深，有明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，已擁有大量的近交系、突變系和封閉群，因此在各種實(shí)驗(yàn)研究中，用量zui大，用途zui多。大型的哺乳動(dòng)物也是有的，但是要做到潔...

視神經(jīng)脊髓炎（neuromyelitisoptica，NMO）診斷目前主要依據(jù)2006年Wingerchuk修訂標(biāo)準(zhǔn)：（1）兩個(gè)必要條件：視神經(jīng)炎和急性脊髓炎；（2）輔助條件：脊髓顯示T2信號(hào)病灶大于3個(gè)或3個(gè)以上椎體節(jié)段；腦部MRI不符合MS診斷標(biāo)準(zhǔn)；血清NMO-IgG陽性。此標(biāo)準(zhǔn)長期以來作為NMO研究診斷的推薦標(biāo)準(zhǔn)，在此標(biāo)準(zhǔn)的輔助診斷條件中提到了脊髓和腦部MRI的應(yīng)用，但是沒有進(jìn)一步的詳細(xì)描述脊髓及腦部MRI的影像特點(diǎn)。因此，重視MRI在診斷NMO中的價(jià)值是非常必要的。在...

ELISA操作實(shí)驗(yàn)中的樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水...

胎牛血清在使用過程中的常見問題1、FBS和FCS的區(qū)別？他們是對(duì)同一種血清產(chǎn)品的同樣確切的描述。2、我的FBS有沉淀物，他們是什么，怎么處理？沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清或者簡單的讓其沉淀在瓶低部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里即可。3、我的FBS部分解凍，該怎么辦？讓血清*解凍，輕輕旋轉(zhuǎn)血清瓶，然后重新冷凍血清。血清質(zhì)量不會(huì)受到影響。4、怎樣熱滅活血清？血清熱滅活是在56℃水浴，放置30分鐘。水位應(yīng)該高于血清水位。在熱滅活...